一种基于TdT和DNAzyme扩增的黄瓜绿斑驳病毒可视化检测方法
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专利申请号:
CN201811029387.8
专利类型:
发明专利
技术分类:
C12Q1/70
专利有效期:
2038-09-05
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专利信息
专利名称:一种基于TdT和DNAzyme扩增的黄瓜绿斑驳病毒可视化检测方法
商品编号:5063714
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申请日期:2018-09-05
公开/公告号:CN109182598A
授权公告日/公开日:2019-01-11
申请/专利权人:
临**学
发明/设计人:
王莹***茂华
主分类号:C12Q1/70
IPC分类号:C12Q1/70; C12Q1/6816
说明书摘要免费下载摘要
本发明公开了一种基于TdT和DNAzyme扩增的黄瓜绿斑驳病毒可视化检测方法,带有部分CGMMV序列的T1和带有Mg2+-依赖的DNAzyme的部分酶序列的P1杂交,AcⅡ识别其底物序列5′-AACGTT-3′,后者被剪切成两部分,随后解链为4个ssDNA片段,加入脱氧核苷酸末端转移酶(TdT)及dCTP,进行加尾反应,生成Mg2+-依赖的DNAzyme的完整酶序列。然后再加入HP,HP的环部位与Mg2+-依赖的DNAzyme的酶序列进行杂交,在Mg2+存在下,Mg2+-依赖的DNAzyme酶序列剪切其识别位点,将HP的茎环结构剪切为两部分,位于茎部位的G-四连体结构被释放,在K+存在下,结合Hemin形成Hemin/G-四连体结构,在H2O2存在下,催化ABTS2-氧化,使溶液变绿。溶液吸光度与CGMMV浓度呈正相关。
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